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日本圓葉海棠(MalusprunifoliaBorkhvar.ringoAsami),別名丸葉海棠,是日本培育蘋果苗木中普遍應用的一種基砧,其顯著特點是扦插繁育能力強,扦插成活率可達90%以上。經(jīng)過組培脫毒的圓葉海棠生長量大,抗逆性強,嫁接親和性好,具有更穩(wěn)定的生長勢,用圓葉海棠扦插繁殖取代實生播種繁殖是蘋果育苗中的一次革命。本文成立的Et本圓葉海棠快繁系統(tǒng),可在短期內(nèi)得到大量無毒無性系砧木,實現(xiàn)周年生產(chǎn),滿足蘋果苗木生產(chǎn)對砧木的需求。
1培育條件
①誘導培育基:MS+6-BA0.3mg/L+NAA0.03mg/L;②增殖培育基:MS+6-BA0.2mg/L+NAA0.02mg/L;③壯苗培育基:MS+6-BA0。1mg/L+NAA0.02mg/L;④生根培育基:1/2MS+IBA0.1mg/L+IAA0.2mg/L。前3種培育基均加蔗糖35g/L,生根培育基蔗糖為23g/L,pH值5.8,培育溫度為25。t2,光照強度為1500~2000Lx,光照時間為14小時/天。
2生長與分化情況
2.1無菌質(zhì)料的處理
選取日本圓葉海棠春季萌發(fā)抽生的新梢莖尖或帶腋芽的莖段,剪生長3~5cm的莖段置于三角瓶中,先用少許洗衣粉浸洗2~3分鐘,然后用自來水沖洗到?jīng)]有泡沫為止,在超凈工作臺上,用0.1%HgCl:消毒8分鐘,再用無菌水淋洗5~6次,濾紙吸干水分,剪生長1~2cm的單芽莖段或帶幾個較小葉片的莖尖,接種于誘導培育基上。
2.2不定芽的分化及叢生芽增殖
芽在誘導培育基上培育20天后開始萌動,伸長成無菌苗。在無菌條件下,將上述伸長苗再切段,每段1~2個芽,接人增殖培育基中,30天后可發(fā)生大量叢生芽,將叢生芽再切段,接種在相同培育基上繼代培育。增殖系數(shù)為7~8。
2.3壯苗培育
在增殖培育基中,得到大量的叢生芽,但芽分化較多,植株生長較細弱,因此,將經(jīng)過繼代增殖的小植株,在生根前接種在壯苗培育基中,舉行壯苗培育,得到結(jié)實的無根試管苗。
2.4誘導生根及移栽
取株高2.5~3cm小苗接種到生根培育基上培育2周左右,生根率達98%。然后在調(diào)控溫室馴化生根20天,當試管苗根長2~3cm、莖干微呈紅色、葉大而濃綠時,啟齒練苗3天,然后用鑷子夾出試管苗,栽入已配好營養(yǎng)土(珍珠巖、麥茬土和河沙按l:2:1夾雜)的六棱型營養(yǎng)缽中,用0.1%多菌靈消毒后,保持80%的濕度,兩周后開始長出新根和新葉,成活率達86%。當長出2~4片真葉時開始移人大田,成活率達98%。
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