日本小葉常春藤為常春藤屬中耐寒性較強(qiáng)的品種，植株生長(zhǎng)結(jié)實(shí)，莖葉濃綠，節(jié)間短粗，組織充分，露地越冬性能良好，在筆者所在的揚(yáng)州地區(qū)已擔(dān)當(dāng)了－10℃至－15℃的低溫檢驗(yàn)。霜后莖葉略披紅暈，為不能多得的冬綠型垂直綠化質(zhì)料，具有很好的推廣應(yīng)用前景。采取莖節(jié)、葉片為外植體，舉行組織培育無(wú)性系快繁，可有用解決生產(chǎn)應(yīng)用歷程中種源希罕、養(yǎng)殖速度低的矛盾。下面就由來(lái)給你介紹日本小葉常春藤組織培育無(wú)性系快繁方式。

質(zhì)料與方式

采取多年生日本小葉常春藤一年生莖枝的莖節(jié)和葉片為外植體。莖節(jié)外植體初代培育，質(zhì)料截成厚0．5厘米的小段，葉片外植體切為0.4×0.5厘米的方塊。培育溫度25℃，光照強(qiáng)度2000lx，光照時(shí)間每天12小時(shí)。

技術(shù)及應(yīng)用

莖節(jié)外植體帶菌度較高，但組織發(fā)育充分，故以中等強(qiáng)度滅菌劑處理為好，即70％酒精0.5分鐘＋0.1％升汞10分鐘，污染率為29.2％。若將0.1％升汞處理時(shí)間增添至15分鐘，雖污染率下降至12.5％，但殺傷率將上升，總體存活率反而會(huì)下降，故不宜采取。莖尖外植體因其組織幼嫩，試驗(yàn)中雖使用較低強(qiáng)度5％的次氯酸鈉處理15分鐘，褐變死亡率仍高達(dá)72.9％；再降低滅菌強(qiáng)度，雖死亡率可以下降，但污染率又上升，在現(xiàn)實(shí)操作中較難把握，故外植體的選用以莖節(jié)為宜。

初代培育效應(yīng)與取材時(shí)期親熱相關(guān)。4月初正值露地種植植株萌芽期，接種后外植體萌發(fā)率較高，達(dá)82.4％；5月上旬取用的為昔時(shí)萌生新梢，質(zhì)料帶菌度低，故接種后污染率較低，為20.1％；7月尾進(jìn)入高溫多濕的梅雨季節(jié)，外植體帶菌度急劇上升，滅菌難題，質(zhì)料污染率上升，高達(dá)89.4％。故日本小葉常春藤的莖節(jié)組織培育，外植體取用時(shí)間以4月初到5月上旬為宜。

組織培育中，生長(zhǎng)素和細(xì)胞激動(dòng)素的添加，均以低濃度為宜。初代培育基以6－BA1.0毫克／升－1＋2.4－D0.1毫克／升－1為好，誘芽率可達(dá)90.5％，顯著高于其他處理。誘芽生長(zhǎng)量達(dá)1.2厘米，呈極顯著變異程度。繼代增殖培育，在6－BA1毫克／升－1程度，生長(zhǎng)素配比量仍以低程度為宜，生長(zhǎng)素種別以NAA優(yōu)于2.4－D，試驗(yàn)范圍內(nèi)以MS＋6－BA1.0毫克／升－1＋NAA0.01毫克／升－1的增殖系數(shù)為高。

葉片愈傷組織誘導(dǎo)培育，接種3天葉片卷曲增厚。這不僅和6－BA／NAA相對(duì)比值有關(guān)(1∶3＞1∶2＞1∶1)，且和其絕對(duì)用量程度慎密相關(guān)，綜合試驗(yàn)效果以MS＋6－BA1.0毫克／升－1＋NAA3.0毫克／升－1時(shí)較高，達(dá)82.4％。

莖節(jié)培育歷程中，經(jīng)多次繼代養(yǎng)殖，發(fā)現(xiàn)有皺葉性狀變異的個(gè)體出現(xiàn)。同樣的性狀變異，在其他常春藤物種中有選育成新品種的應(yīng)用類型，若能將變異性狀加以星散、牢靠，并擴(kuò)大養(yǎng)殖，在提高其觀賞特征上具良好的應(yīng)用前景，不失為一條途徑。若能將組織培育技術(shù)和輻照誘變等育種手段相結(jié)合，則對(duì)常春藤育種研究有很大幫助。