丁愛萍 謝良生 藍(lán)翠鈺 張艷春

(深圳市城管局園林科研所518003)

摘要 以美人蕉莖尖為外植體舉行快速繁殖。在MS+2mg/l BA+0.2mg/l NAA的培育基上得到愈傷組織，該愈傷組織在MS+5mg/1BA+1mg/l NAA的培育基上分化出不定芽。在MS+5mg/l BA的培育基上，接種莖尖直接長成無根新梢。在1/2MS+0.5mg/l NAA的培育基上，無根苗生根長成完整植株。6～8cm高小苗可出瓶移栽，成活率為100%。

下午詞 美人蕉；莖尖培育；快速繁殖

美人蕉(Canna generalis Bailey)為我市主栽的行道花卉和花壇花卉之一，具有較強(qiáng)的觀賞性。但由于多年來一直采取分切根狀莖的方式舉行繁殖，出現(xiàn)病毒病害及品種退化問題。延續(xù)的營養(yǎng)繁殖，使得病毒迅速流傳，病情逐年加重。而病毒病害是藥物防治不能消除的。采取現(xiàn)代生物技術(shù)方式對(duì)美人蕉舉行莖尖脫毒，再用組織培育法得到無病毒種苗，進(jìn)一步確立無病毒種苗無性系并舉行快速繁殖，可迅速得到大批量優(yōu)質(zhì)、無病毒美人蕉種苗，從而，從基本上解決美人蕉花葉病問題。本文報(bào)道了美人蕉莖尖脫毒及確立美人蕉無病毒種苗無性系的研究效果。

1 材料與方式

1．1 材料

供試材料為大花美人蕉品種：深圳紅，深圳粉，優(yōu)麗，大金邊，鴛鴦，總統(tǒng)，金脈，阿旺，二喬，橘紅大花。

1.2 外植體處理

取帶芽胞的美人蕉根莖，常規(guī)消毒后用75%乙醇棉擦拭，再用0.1% HgCl2消毒10分鐘，無菌水沖洗5次。在超凈臺(tái)上，剖解鏡下剝?nèi)∏o尖，大小控制在0.5～1 mm，接種在培育基上。

1.3 培育基

脫分化培育基：MS+2 mg/l BA+0.2 mg/l NAA

分化培育基：MS+5 mg/l BA+1 mg/l NAA

直接生長培育基：MS+5 mg/l BA

生根培育基：1/2MS+0.5 mg/l NAA

1．4 培育條件

培育溫度為28±2℃，光照強(qiáng)度為1500 Lux，每天光照10小時(shí)。

2 效果與分解

2．1 外植體接種污染率由50%降低到1～5%

由于所取外植體為生長在土壤中的根莖，含有大量雜菌，很難消毒，采取封鎖式振搖滅菌法[1]，使大批量接種的接種污染率降低到5%以下。

2．2 誘導(dǎo)脫分化并形成愈傷組織

在脫分化培育基上，經(jīng)30～40天培育有45～53%的外植體形成黃綠色形態(tài)較好的愈傷組織。供試的8個(gè)不同激素配比的培育基，其上接種的外植體，都或多或少地可發(fā)生愈傷組織，有的愈傷組織質(zhì)地較硬，有的較松散，這些愈傷組織轉(zhuǎn)入分化培育基后，都不分化不定芽。只有在脫分化培育基上發(fā)生的黃綠色的愈傷組織轉(zhuǎn)入分化培育基后，才會(huì)分化出不定芽。

2．3 誘導(dǎo)愈傷組織分化不定芽

將脫分化培育基上發(fā)生的愈傷組織轉(zhuǎn)到分化培育基上，經(jīng)約35天培育，約莫80%的愈傷組織上可發(fā)生3～4個(gè)不定芽。

2．4 接種莖尖直接長大，形成無根新梢

在MS+5 mg/l BA培育基上，有約50%的接種莖尖，經(jīng)40～50天培育，莖尖逐步發(fā)育成芽。

2.5 不定芽擴(kuò)大繁殖

長到2～3 cm高的不定芽，再轉(zhuǎn)到MS+5 mg/l BA的培育基上，經(jīng)30天培育，在每個(gè)芽的基部長出3～4個(gè)側(cè)芽，這樣，每個(gè)繼代都以3～4倍的速度不停擴(kuò)大繁殖。

2．6 形成完整植株

在繁殖歷程中，將長到3 cm左右的小苗轉(zhuǎn)到生根培育基上，經(jīng)15天培育，可在基部長出3～4條根，這時(shí)即可出瓶移栽。

2．7 移栽成活

出瓶前，需打開瓶口，練苗2-3天，移栽時(shí)不能傷根。移栽的較佳溫度為18～25℃，移栽初期應(yīng)保持60%以上的相對(duì)濕度，并制止陽光直射，土壤使用普通園土即可。到達(dá)以上條件時(shí)，移栽苗成活率險(xiǎn)些到達(dá)100%。

3 討論

美人蕉莖尖培育難度較大。首先。舉行莖尖脫毒，需取小于1 mm的莖尖，才能保證脫除CMV病毒，但小莖尖培育成活難度較大，下午技術(shù)是剝?nèi)∏o尖時(shí)勿使莖尖受傷褐化，操作速度又要快，勿使組織在空氣中露出時(shí)間過長。第二，莖尖培育成活后，誘導(dǎo)其分化出側(cè)芽，需較大量細(xì)胞盤據(jù)素，但同時(shí)細(xì)胞盤據(jù)素過量，就會(huì)發(fā)生玻璃苗。下午技術(shù)是，將培育基中BA控制在5 mg/l，即可保證小苗以3～4倍的速度擴(kuò)大繁殖，又可制止出現(xiàn)玻璃苗。第三，確立無病毒種苗無性系后要防止其老化，我們的經(jīng)驗(yàn)是2～3年舉行一次更新，以保持其較高的繁殖速度。

參考文獻(xiàn)

[1] 丁愛萍等.紅掌組織培育研究.中國花卉園藝，2003(5)：24-26.